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四种梅毒检测方法的效果对比

时间:2015-11-12 来源:学术堂 所属分类: 性医学论文
标题

  梅毒最普遍的实验室检测方法仍是梅毒血清学检查,而其中最常用的血清学检测方法为TRUST,RPR,TPPA及TP-ELISA,但如何选择检测方式各实验室不尽相同。本文就这四种检测方法对梅毒的判定作用和如何提高检出率及准确率进行比较分析,以便建立一套适合自己的完整的梅毒实验室检测报告系统,为临床提供快速可靠的参考结果。

  1对象与方法

  1.1对象

  2014年1~11月我院住院及门诊患者15000例,年龄1~85岁。

  1.2试剂与方法

  梅毒快速血浆反应素(RPR)测定试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供。甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)诊断试剂盒,是由上海荣盛生物技术有限公司提供。双抗原夹心法试剂(TP-ELISA)由北京万泰生物药业股份有限公司提供。梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)试剂由富士生物株式会社提供。所有实验均按照标准操作进行。

  2结果
  
  15000例中血清学阳性病例330例,阳性率为2.2%;TPPA阳性率为2.17%;TP-ELISA阳性率为2.13%;RPR阳性率为0.99%;TRUST阳性率为1.01%.330例血清学阳性病例确认梅毒病例324例,感染率为2.16%.具体结果见表1.

  324例梅毒确认病例:TPPA阳性323例,检出率为99.7%TP-ELISA阳性319例,检出率为98.5%RPR阳性145例,检出率为44.8%TRUST阳性147例,检出率为45.4%.TPPA+RPR阳性324例,检出率为100%,TPPA+TRUST阳性324例,检出率为100%,TP-ELISA+RPR阳性323例,检出率为99.7%,TP-ELISA+TRUST阳性323例,检出率为99.7%.

  3讨论
  
  本实验TPPA阳性率在4种试验中最高为2.17%,在梅毒确认病例中检出率达99.7%.TPPA操作简便,结果易于判断,报告速度快。但TPPA是手工操作、肉眼观察、结果不易保存、对操作人员的要求高、试剂价格昂贵.

  而且因为样本个体之间的差异,部分患者会产生与致敏粒子包被的抗原产生非特异性反应,造成异常结果。可能造成异常结果的疾病有:自身免疫性疾病、肿瘤、皮肤病服用了含有免疫球蛋白血液制品等。在本实验中模式2与模式6各出现了1例假阳性结果,模式2病例为ANA(+)患者,体内疑似有干扰物质存在,模式6病例在检测前经临床证实应用过免疫球蛋白,影响了TPPA的检测。

  TP-ELISA方法利用基因工程技术,将TP重组抗原包被在微孔测定板上,利用HRP标记重组抗原,通过ELISA法测定患者血清中特异性抗体,测定梅毒螺旋体感染的敏感性较高,在本实验中TP-ELISA阳性率为2.13%,在梅毒确认病例中检出率达98.5%.模式6病例,由于免疫球蛋白制剂的使用造成了TPPA的假阳性,而TP-ELISA却不受影响,结果为阴性。但是由于ELISA法主要通过基因工程途径生产重组15kDa,17kDa,47kDa 3种蛋白制备梅毒抗体检测试剂,而梅毒螺旋体含有20多种不同分子量的蛋白,因此实际检测中可能有一些非主要梅毒抗原产生的抗体,可能被漏检,在本实验中模式3与模式6中有5例因此原因出现了漏检。

  TPPA和TP-ELISA梅毒早期诊断好,本实验中TPPA与TP-ELISA检出率很高。但是由于检测的是梅毒的混合抗体Ig-G和Ig-M,梅毒抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率甚至终身阳性,因此TPPA和TP-ELISA阳性不能判断梅毒疾病活动与否,不能作为疗效监测手段。

  TRUST与RPR方法均检测的是人体内反应素,阳性率不高。在本文中TRUST与RPR阳性率分别为1.01%、0.99%,在梅毒确认病例中检出率为45.4%、44.8%,远远低于TPPA与TP-ELISA.本实验中TRUST与RPR比较,结果基本一致。模式4中有两例RPR阴性,TRUST阳性,但TRUST为弱阳性(肉眼判断临界值),可能与人为主观判断有关。

  TRUST与RPR检测的是非特异性脂质,有一定假阳性,本实验出现了5例假阳性病例。除梅毒外,患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等,都可导致TRUST与RPR阳性,所以其敏感性差,不能用来作为诊断梅毒的确诊依据。另外由于螺旋体破坏人体组织过程中所释放的物质间接引起的抗体出现晚于特异性螺旋抗体,且在晚期梅毒或治疗后梅毒可能转阴,因此该试验不适合一期、三期和治疗后梅毒的诊断。但是,非特异性类脂质抗体经抗梅毒治疗后,滴度迅速下降,所以此方法可用于观察疗效。

  4种试验中RPR、TRUST敏感度较低,不适用于梅毒螺。旋体感染的筛查,可用于观察疗效,指导临床治疗。ELISA检测梅毒螺旋体抗体的阳性率较高,操作简便,适用于临床大样本量筛查,TPPA由于手工操作,不宜于标准化操作,适用于做进一步确认试验[1].在本实验中TPPA+RPR阳性324例,检出率为100%,TPPA+TRUST阳性324例,检出率为100%,TP-ELISA+RPR阳性323例,检出率为99.7%,TP-ELISA+TRUST阳性323例,检出率为99.7%.联合检测可进一步提高阳性检出率,避免漏检[2].

  参考文献:
  [1] 李志艳,刘平,高健.梅毒螺旋体抗体筛查方法的比较性研究[J].中华检验医学杂志,2012,12:1176-1179.
  [2] 王珍光,郭建巍,马骢,等.梅毒检测方法的临床应用研究[J].现代检验医学杂志,2011,1:152-155.

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